GST標簽蛋白（谷胱甘肽S-轉移酶標簽蛋白）是一種廣泛用于分子生物學中的融合蛋白標簽。GST是一種催化藥物代謝的酶，能夠與谷胱甘肽（GSH）結合。通過在目標蛋白質上附加GST標簽，可以方便地純化目標蛋白，并進一步分析其功能和性質。
GST標簽的優勢：
1.提高蛋白表達：有助于蛋白質的表達，因為GST本身能穩定目標蛋白，減少其在細胞內的降解。
2.高親和力結合：GST與谷胱甘肽的結合具有非常強的親和力，這使得GST標簽在目標蛋白純化中非常有效。
GST標簽在蛋白純化中的應用：
1.融合表達：通過基因工程技術，將目標蛋白的基因與GST基因融合，在表達系統（如大腸桿菌）中表達。
2.蛋白質提取：從表達系統中提取細胞裂解液。
3.親和層析：將裂解液通過包含谷胱甘肽的親和柱，GST標簽會與谷胱甘肽結合，從而使目標蛋白被富集。
4.洗脫：通過使用過量的游離谷胱甘肽或改變鹽濃度洗脫目標蛋白。
1.蛋白互作研究：通過將其與其他可能的互作蛋白一起表達，可以通過GSTpull-down實驗研究蛋白間的相互作用。
2.抗體生成：GST融合蛋白也可用于抗體的制備，因為GST本身是一個高免疫原性的蛋白，能夠激活免疫系統。
3.蛋白定位和功能分析：研究人員可以追蹤目標蛋白在細胞內的位置和動態變化，進而分析其功能。
GST標簽蛋白的改進與變種：
雖然GST標簽是一種非常有用的工具，但也存在一些限制。例如，GST標簽可能會影響目標蛋白的折疊、活性或穩定性。因此，研究人員開發了許多不同的變種，以提高效率或減小對目標蛋白的干擾。
1.GST-fusion蛋白變種：包括雙標簽系統（如GST與His標簽的組合），這種系統可以進一步提高純化效率，或改善對某些蛋白的親和性。
2.清洗和去除標簽：通過使用特定的酶（如HRV3C蛋白酶、PreScission蛋白酶）切割GST標簽，使得研究人員能夠去除GST標簽后得到純凈的目標蛋白。
更新時間：2025-08-18
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