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動物注射總失???一篇幫你搞定所有難題!

更新時間:2025-09-11點擊次數:179

在疾病治療研究中,藥物需通過口服、注射等途徑遞送至體內以發揮療效。在基礎科研中,使用慢病毒、腺相關病毒(AAV)等工具病毒通過注射方式導入動物模型,是研究基因功能、代謝途徑及疾病機制的重要手段。選擇合適的體內注射策略對實驗結果的可靠性與重復性至關重要。下文將系統介紹常見注射途徑的操作步驟與注意事項,為實驗人員提供參考。

 

 

一、如何通過尾靜脈注射實現高效系統遞送?

 

尾靜脈注射是小鼠和大鼠系統中廣泛應用的給藥方式,適用于病毒載體、藥物或細胞的高效輸送。

操作步驟:

1.輕柔提取小鼠,置于鼠籠蓋或操作者手背進行安撫;

2.將動物裝入固定器,露出尾部,用酒精棉球擦拭或適度加熱(如溫水或燈照)以擴張血管;

3.拉直尾巴,識別尾靜脈位置;

4.于尾尖1/3處進針,若阻力小且進針順暢,提示針頭位于血管內;

5.回抽注射器,若有回血則可緩慢注射;

6.注射完畢后用棉球輕壓注射點約1分鐘以防出血;

7.將動物放回籠中觀察。

 

補充說明:

病毒注射量需嚴格按體重及實驗需求調整。例如6周齡大鼠(約150g)可注射AAV9,典型劑量為3×1013 – 1×101? v.g./kg,體積不超過200µl。

 

二、顳靜脈注射適用于新生小鼠嗎?

 

顳靜脈或面靜脈注射常用于新生小鼠,因其血管較為明顯且操作可視性好。

操作步驟:

1.將幼鼠置于濕冰上30–60秒實現輕度麻醉,注意避免過長時間導致并發癥;

2.準備注射器,吸入約30µl試劑(如伊文思藍);

3.在顯微鏡下固定小鼠頭部,識別顳靜脈;

4.斜面向上進針,可見血液回流顯示成功進入血管;

5.緩慢推注,觀察血管是否發生漂白現象;

6.注射后留置針頭10–15秒,防止反流。

 

三、腹腔注射應注意哪些操作細節?

 

腹腔注射(IP)操作簡便、適用性廣,適合大體積藥液注射,但需注意避免損傷內臟。

操作步驟:

1.固定動物,使其腹部朝上,頭部略低;

2.選擇下腹部距離腹白線約0.5 cm處作為進針點;

3.以約30°角刺入腹腔,進針不宜超過1 cm;

4.回抽無血無體液后緩慢注射;

5.拔針時輕微旋轉以防漏液;

6.放回動物并持續觀察其狀態。

 

四、如何完成精準的視網膜下注射?

 

該技術適用于眼科疾病模型及基因治療研究,操作精度要求高,常需顯微手術設備輔助。

操作步驟:

1.麻醉動物并瞳孔擴張;

2.準備微量注射器(病毒液量1.5–2µl);

3.開瞼并放置蓋玻片以清晰顯示視網膜;

4.于角膜緣后方穿孔,插入33 G鈍頭針;

5.緩慢注入病毒液,觀察視網膜下水泡形成;

6.輕柔退針并閉合眼瞼。

 

五、腦立體定位注射如何實現核團特異性遞送?

 

該法用于精準腦區注射,需依賴腦立體定位儀和腦圖譜坐標。

操作步驟:

1.麻醉動物并頭部固定于定位儀;

2.剃毛消毒后切開頭皮,暴露顱骨及前囟(Bregma)、后囟(Lambda);

3.根據圖譜確定目標核團坐標,鉆孔開窗;

4.使用微量注射系統緩慢注入病毒;

5.注畢留針數分鐘,防止反流;

 6.縫合皮膚,復蘇動物并后續觀察。

 

六、其他常見注射方式有哪些?

 

還包括肌肉注射(IM)、皮下注射(SC)、皮內注射(ID)、灌胃(IG)及鞘內注射(IT)、脊神經注射等,各適用于不同研究目的:

  • 肌肉注射:常用于疫苗或基因治療,多選擇股四頭肌或大腿外側肌群;

  • 皮下注射:適用于緩釋制劑,注射時拉起皮膚形成“帳篷"結構;

  • 皮內注射:用于免疫激發實驗,注射后可見明顯皮內水皰;

  • 灌胃:用于口服給藥,需使用帶球狀頭部的灌胃針避免誤入氣道;

  • 鞘內注射:適用于中樞神經系統藥物遞送,需準確識別椎間隙;

  • 脊神經注射:用于周圍神經疾病模型,操作復雜度高,常需顯微分離技術。

 

結語

 

選擇合適的體內注射方式需綜合考慮研究目的、動物模型、試劑特性及操作可行性。嚴格執行操作規范、注重動物福利及倫理要求,是保證實驗科學性和結果可靠性的基礎。建議初次操作者在經驗豐富人員指導下進行,并積極利用視頻教程與實驗指南等資源提升操作一致性。


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