在當(dāng)今科研與藥物研發(fā)并重的時代，探索分子間相互作用已成為眾多研究者必須面對的核心課題。無論是蛋白-蛋白、蛋白-DNA還是蛋白-RNA互作，可靠的研究手段對推進(jìn)科學(xué)發(fā)現(xiàn)與藥物開發(fā)至關(guān)重要。然而，傳統(tǒng)方法如酵母雙雜交假陽性率高、Co-IP難以證明直接作用、FRET成本高昂，均存在明顯局限。是否存在一種高效、精準(zhǔn)且可定量分析分子互作的技術(shù)？隨著《中國藥典2020版》將表面等離子共振技術(shù)（SPR）正式納入，這一方法正逐漸走入科研與工業(yè)應(yīng)用的視野。

1.為何SPR技術(shù)在分子互作研究中脫穎而出？

表面等離子共振（SPR）是一項(xiàng)實(shí)時、無標(biāo)記的生物分子互作分析技術(shù)。其優(yōu)勢在于能夠?qū)崟r監(jiān)測分子結(jié)合與解離過程，并精確計(jì)算動力學(xué)參數(shù)（如結(jié)合常數(shù)KD、解離速率koff等），實(shí)現(xiàn)對作用強(qiáng)度的定量評價(jià)。同時，SPR無需對樣本進(jìn)行熒光或放射性標(biāo)記，避免了因標(biāo)記引起的構(gòu)象改變，最大限度維持了生物分子的天然狀態(tài)。實(shí)驗(yàn)流程簡便、周期短，可在較短時間內(nèi)完成大量互作驗(yàn)證與篩選任務(wù)，顯著提升科研與藥物研發(fā)的效率。

2.SPR如何助力抗原表位分析與抗體開發(fā)？

在 therapeutic antibody 的開發(fā)中，明確抗原-抗體結(jié)合表位至關(guān)重要。SPR可用于鑒定不同單抗是否結(jié)合在同一抗原表位，為指導(dǎo)抗體配對、開發(fā)聯(lián)合用藥（如“雞尾酒療法"）及生物類似藥比對提供關(guān)鍵依據(jù)。通過實(shí)時分析結(jié)合曲線與競爭實(shí)驗(yàn)，研究者可快速區(qū)分不同抗體的結(jié)合特征與表位分組，為后續(xù)藥物優(yōu)化與創(chuàng)新療法設(shè)計(jì)奠定基礎(chǔ)。

3.能否用SPR驗(yàn)證已知分子互作？

是的。SPR不僅可用于初篩，更是強(qiáng)有力的互作驗(yàn)證工具。在已有酵母雙雜交、Co-IP等初步證據(jù)的基礎(chǔ)上，SPR可進(jìn)一步提供動力學(xué)和親和力數(shù)據(jù)，從定量角度確認(rèn)互作的真實(shí)性與強(qiáng)度，極大豐富課題數(shù)據(jù)的層次性與說服力。該技術(shù)廣泛適用于蛋白、核酸、小分子等多種生物體系互作驗(yàn)證，是推進(jìn)課題進(jìn)展和多角度數(shù)據(jù)呈現(xiàn)的有效手段。

4.SPR如何在藥物篩選中發(fā)揮重要作用？

在新藥研發(fā)的早期階段，SPR可用于從大量候選分子中快速篩選出與靶點(diǎn)具有高親和力和特異性的先導(dǎo)化合物。無論是抗體藥物、多肽還是小分子，SPR均可實(shí)時監(jiān)測其與靶標(biāo)的結(jié)合行為，評估親和力、特異性與動力學(xué)特性，顯著提高篩選效率與成功率，降低后續(xù)開發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

結(jié)語

SPR技術(shù)因其實(shí)時、無標(biāo)記、可定量和高效的特點(diǎn)，已成為分子互作研究及藥物開發(fā)中重要的工具。從抗原表位分析、互作驗(yàn)證到高通量藥物篩選，SPR為科研與工業(yè)界提供了堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支持。在多元方法并存的今天，合理引入SPR將有助于研究者獲取更可靠、更豐富的數(shù)據(jù)，推動科學(xué)探索與藥物創(chuàng)新邁向新階段。